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古柏线虫通用PCR检测试剂盒
物品单位 价格 品牌
千克 280 上海沪峥
  • 产地:国内
  • 货号:HZT2466
  • 发布日期: 2021-03-25
  • 更新日期: 2021-04-21
产品详细说明
产地 国内
品牌 上海沪峥
货号 HZT2466
用途范围 仅限科研
纯度 详询客服%
CAS编号
规格 50T/盒
是否进口

古柏线虫通用PCR检测试剂盒
试剂盒准备物品
清理液(A)                                    毫升
染色液(t B)                                  微升
稀释液(C)                                    毫升
溶解液(tD)                                   毫升
产品说明书                                       1份
反应五要素
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
古柏线虫通用PCR检测试剂盒注意事项
1.基础程序。
2.扩增温度和延伸温度。
3.反应时间。
4.循环次数。
5.PCR 反应液的配制。
6.PCR技术的基本原理。
7.PCR的反应动力学。
8.PCR扩增产物。
9.PCR反应体系与反应条件。